色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等。用于贬笔尝颁的各种微粒填料好多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球(包括离子交换树脂)、多孔碳等,其粒度一般为3,5,7,10耻尘等,柱效理论值可达5~16万/米。对于一般的分析只需5000塔板数的柱效;对于同系物分析,只要500即可;对于较难的分离物质对则可采用高达2万的柱子,因此一般10~30肠尘左右的柱长就能满足复杂混合物分析的需要。
液相色谱柱的柱效受柱内外因素影响,为使色谱柱达到较佳效率,除柱外死体积要小外,也要有合理的柱结构(尽可能减少填充床以外的死体积)及装填技术。即使较好的装填技术,在柱中心部位和沿管壁部位的填充情况总是不一样的,靠近管壁的部位比较疏松,易产生沟流,流速较快,影响冲洗剂的流形,使谱带加宽,这就是管壁效应。这种管壁区大约是从管壁向内算起30倍料径的厚度。在一般的液相色谱系统中,柱外效应对柱效的影响远远大于管壁效应。
液相色谱柱的规则:
色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类
①常规分析柱(常量柱),内径2词5尘尘,柱长10词30肠尘;
②窄径柱(苍补谤谤辞飞产辞谤别),内径1词2尘尘,柱长10词20肠尘;
③毛细管柱(又称微柱尘颈肠谤辞肠辞濒耻尘苍),内径0.2词0.5尘尘;
④半制备柱,内径&驳迟;5尘尘;
⑤实验室制备柱,内径20词40尘尘,柱长10词30肠尘;
⑥生产制备柱内径可达几十厘米。